内分泌腺及全身性疾病论文_miR-21对骨质疏松小
文章目录
1 材料和方法
1.1 材料、骨质疏松症小鼠模型构建
1.2 BMSCs分离、培养及纯化
1.3 主要试剂和仪器
1.4 RT-PCR检测
1.5 miR-21转染小鼠BMSCs
1.6 MTT法检测细胞增殖情况
1.7 BMSCs成骨诱导与茜素红染色
1.8 Western-blotting检测
1.9 统计学分析
2 结果
2.1 骨质疏松小鼠BMSCs中miR-21表达水平
2.2 miR-21转染骨质疏松小鼠BMSCs验证
2.3 miR-21对骨质疏松小鼠BMSCs增殖的影响
2.4 miR-21对骨质疏松小鼠BMSCs成骨能力的影响
3 讨论
文章摘要:目的探讨miR-21对骨质疏松小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)增殖的影响。方法采用双侧卵巢切除法构建骨质疏松小鼠模型(VOX),分离、培养、纯化小鼠BMSCs并采用si PORT Neo FX转染pre-miR-21、pre-miR-negative control(pre-miR-NC)、antmiR-21、ant-miR-negative control(ant-miR-NC)并进行RT-PCR验证,MTT法检测小鼠BMSCs增殖情况、茜素红与碱性磷酸酶染色法检测小鼠BMSCs成骨能力、Western-blotting检测细胞增殖、成骨分化相关蛋白水平。结果骨质疏松症小鼠BMSCs中miR-21相对表达水平低于Ctrl组(P<0.05),OVX-pre-miR-21组BMSCs中miR-21相对表达水平、细胞增殖、PCNA水平、Ki-67水平、ALP染色程度、ALP活性、茜素红染色程度、Runx2水平、Osterix水平均高于OVX-pre-miR-NC组(P<0.05),OVX-premiR-NC组BMSCs中miR-21相对表达水平、细胞增殖、PCNA水平、Ki-67水平、ALP染色程度、ALP活性、茜素红染色程度、Runx2水平、Osterix水平均显著低于Ctrl-pre-miR-NC(P<0.05); OVX-ant-miR-21组BMSCs中miR-21相对表达水平、细胞增殖、PCNA水平、Ki-67水平、ALP染色程度、ALP活性、茜素红染色程度、Runx2水平、Osterix水平均显著低于OVX-ant-miR-NC组(P<0.05),OVX-ant-miR-NC组BMSCs中miR-21相对表达水平、细胞增殖、PCNA水平、Ki-67水平、ALP染色程度、ALP活性、茜素红染色程度、Runx2水平、Osterix水平均显著低于Ctrl-ant-miR-NC(P<0.05)。结论提高miR-21表达水平可促进骨质疏松小鼠BMSCs增殖能力与成骨分化能力。
文章关键词:
论文分类号:R580
文章来源:《材料研究学报》 网址: http://www.clyjxbzz.cn/qikandaodu/2021/1113/1921.html